一、前言 掌握動(dòng)情周期之狀態(tài)，可使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物確實(shí)配種，達(dá)到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物計(jì)劃性 繁殖的重要環(huán)節(jié)；其檢測(cè)方式如陰道抹片、陰道電阻與內(nèi)分泌檢測(cè)等，在 此以最簡(jiǎn)單快速之陰道抹片檢測(cè)法做介紹，藉由生理食鹽水于陰道反覆沖 洗，取得剝落之細(xì)胞來(lái)作為判別依據(jù)。 小鼠為多發(fā)情動(dòng)物(polyestrous)，且 全年均可繁衍，動(dòng)情周期平均為4-6天，依其種別、飼料及飼養(yǎng)方式有差 異。 一般可將動(dòng)情周期分為四個(gè)階段，發(fā)情前期(proestrus)、發(fā)情期(estrus)、 發(fā)情后期(metestrus)、發(fā)情間期(diestrus)。

二、材料 (一)7-8周齡之CD-1母鼠。 (二)玻璃針、乳頭滴管(沖洗陰道)。 (三)酒精燈(燒圓玻璃針前端)。 (四)生理食鹽水(沖洗陰道)。 (五)載玻片(觀察并染色)。 (六)Wright-Giemsa染劑(其他染劑均可)。 (七)PBS buffer pH 6.8(除去多余染劑)。 (八)倒立顯微鏡(觀察細(xì)胞相)。

三、方法 (一)玻璃針以超音波震蕩清洗干凈，并施以濕熱滅菌。 

(二)挑選外觀正常7-8周齡之性成熟母鼠；如為群飼之母鼠，于試驗(yàn)前可 將些許公鼠使用過(guò)之墊料灑至母鼠籠，或注射激性腺素(gonadotropin)， 如孕馬血清激素(pregnant mare serum gonadotropin, PMSG)與人類(lèi)絨 毛膜激性腺素(human chorionic gonadotropin, hCG)，有利于后續(xù)之觀 察。 

(三)以酒精燈之火焰邊緣將玻璃針前端切口燒圓，可避免操作時(shí)造成陰部 傷害。 

(四)母鼠保定，以背抓之方式將其頸部及背部皮層固定，并觀察外陰部之 變化。 

(五)將玻璃針小心插入陰道鞘(vaginal orifice)約1 mm，以少量生理食鹽水 沖洗陰道數(shù)次。 切勿過(guò)于深入、過(guò)度撐大陰道及觸碰子宮頸(cervix)， 可能造成偽懷孕(pseudopregnancy)之情形，不利于之后之觀察。 

(六)將陰道沖洗液滴于載玻片之上，以另一玻片將其平均推開(kāi)。 

(七)以Wright-Giemsa染劑(或單獨(dú)使用Wright或Giemsa均可)，將推開(kāi) 之陰道沖洗液完全覆蓋，靜置3分鐘。 

(八)滴上PBS buffer pH6.8洗去多余之染劑，并將載玻片完全覆蓋，靜置 3分鐘。 

(九)以水或PBS buffer沖洗載玻片，風(fēng)干3分鐘。 

(十)置于顯微鏡下觀察，計(jì)算各種類(lèi)細(xì)胞之?dāng)?shù)目及比率。

(十一)每日重復(fù)上述步驟執(zhí)行一周，可得到各細(xì)胞于動(dòng)情周期中之分布。 

(十二)動(dòng)情周期之判讀 1.發(fā)情前期：行為上不接受雄性之交配。 此時(shí)期卵巢(ovary)表面前 一周期形成之黃體(corpora lutea)萎縮，新的濾泡開(kāi)始發(fā)育，使雌

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