三種常用免疫定位的酵素之優(yōu)缺點有哪些？

AP
優(yōu)點
1.較其它酵素有較低的nonspecific background
2.可應(yīng)用在EIA、IB、IH（P）、IC等技術(shù)
3.多種可溶及不可溶的反應(yīng)產(chǎn)物
4.大部分的受質(zhì)及產(chǎn)物無毒性
5.反應(yīng)速率屬HRP為線性    

缺點
1.易受Endogenous AP的影響
2.sensitivity較HER低，反應(yīng)速率較慢



HRP
    
優(yōu)點
1.因HRP含F(xiàn)e故可應(yīng)用在EM
2.可應(yīng)用在EIA、IB、IH（P）、IC等技術(shù)
3. 多種可溶及不可溶的反應(yīng)產(chǎn)物
4.反應(yīng)速率快，故反應(yīng)時間較短，且敏感性高    

缺點
1.有些細胞有很高之background
2.須有較多blocking及 washing的步驟（HRP較頑強）


GO
優(yōu)點
1.無Endogenous GO的問題
2.可應(yīng)用在IB、IH（P）、IC形成不可溶的產(chǎn)物    

缺點
1.不能用在EIA上


AP：Alkaline Phosphatase
HER：Horse radish Peroxidase
GO：Glucose Oxidase

AP 常用的試劑    顏色    應(yīng)用技術(shù)    水溶性    備注
BCIP/NBT    藍    IB、ISH    不可溶    最常用
PNPP    黃    EIA    可溶    
HRP常用的試劑    顏色    應(yīng)用技術(shù)    水溶性    備注
DAB    藍黑    IB、IH        IH、IB最常用
AEC    紅    IH    可溶    
4CN    藍灰    IB    不可溶    
TMB    藍    IB    不可溶    
ABTS    綠    EIA    可溶    EIA最常用

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