標(biāo)題：應(yīng)用顯微鏡觀察到單細(xì)胞的朝向和定向遷移
信息分類(lèi):站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2017-3-16 17:25:52
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正文:
應(yīng)用顯微鏡觀察到單細(xì)胞的朝向和定向遷移
濾膜趨化實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)前需適當(dāng)選擇：①細(xì)胞培養(yǎng)皿(如Neuro Probe公司生產(chǎn)的盲孔
培養(yǎng)皿或多孔培養(yǎng)皿，也可選用帶有濾膜嵌套的24孔培養(yǎng)板)；②濾膜(
較厚的纖維素硝酸鹽或較薄的聚碳酸鹽)；③濾膜孔徑大��；④濾膜表
面包被(根據(jù)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞類(lèi)型)。通過(guò)下列檢測(cè)使細(xì)胞遷移定量：①細(xì)胞遷
移入濾膜的距離；②貼于濾膜底面的細(xì)胞數(shù)；③穿經(jīng)濾膜和掉人下池的
細(xì)胞數(shù)。如果一種因子引起細(xì)胞遷移增強(qiáng)，需進(jìn)行其他實(shí)驗(yàn)以確定是否
由隨機(jī)遷移(化學(xué)促進(jìn)作用)或向試劑定向運(yùn)動(dòng)(趨化作用)，或兩種協(xié)同
作用引起的。將待測(cè)物注入濾膜的上方和下方，按一系列均一(各向同
性的)濃度檢測(cè)細(xì)胞遷移，以此可觀察化學(xué)促進(jìn)作用。
計(jì)算化學(xué)吸引系數(shù)和趨化系數(shù)。
因大多數(shù)化學(xué)吸引劑呈劑量依賴(lài)性刺激細(xì)胞運(yùn)動(dòng)，故需仔細(xì)分析，
鑒別化學(xué)吸引劑刺激引起的運(yùn)動(dòng)(化學(xué)促進(jìn)作用)和定向運(yùn)動(dòng)(趨化作用)
。解決方法是，通過(guò)觀察同一部位化學(xué)吸引劑(摻入瓊脂糖)在不同濃度
情況下對(duì)于細(xì)胞遷移的作用，檢測(cè)化學(xué)吸引劑刺激引起的運(yùn)動(dòng)。根據(jù)測(cè)
量數(shù)據(jù)可計(jì)算化學(xué)促進(jìn)系數(shù)，而化學(xué)促進(jìn)系數(shù)可用于評(píng)價(jià)化學(xué)促進(jìn)和趨
化作用對(duì)于細(xì)胞以化學(xué)吸引梯度形式遷移的相對(duì)作用。通過(guò)用錄像顯微
鏡觀察細(xì)胞遷移，可觀察到單細(xì)胞的朝向和定向遷移。對(duì)于已固定細(xì)胞
，有研究者以細(xì)胞核是否朝向確定細(xì)胞是否朝向化學(xué)吸引源。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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