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正文:
實驗室用桿菌細胞實驗培養(yǎng)檢測圖像
顯微鏡
(1) 轉化。重組DNA分子的擴增需要環(huán)狀DNA轉染進人合適的宿主細胞。
新的重組I)NA分子隨著細胞的復制而擴增。整個過程叫做轉化,同時環(huán)
狀DNA被獲得新的性質的宿主細胞所攝取。細胞吸收DNA的確切過程并不
清楚,在大腸桿菌中用兩種方法,包括電穿孔法和輕微的熱激法來進行
DNA的轉化。結果是膜出現裂縫,同時小的環(huán)狀DNA被宿主細胞吸收。以
大腸桿菌為例,轉化過程需要特殊的處理,細胞通常被叫做“感受態(tài)”
,意思是他們處在一種易被質粒DNA轉化的狀態(tài)。
(2)重組鑒定。細胞如大腸桿菌在轉化以后可以在富含營養(yǎng)的培養(yǎng)
基上生長,在這里,許多載體中含有的標記基因是非常有用的。在實驗
室用的一般的大腸桿菌細胞缺乏對抗生素,如氨芐青霉素、四環(huán)素和卡
那霉素的抵抗力。然而用含有一兩個抗生素抗性基因的載體轉化的大腸
桿菌可形成有抵抗力的細胞。因此當細胞生長在含有一種抗生素的瓊脂
培養(yǎng)基中時,只有被含有抗生素抗性基因的質粒轉化的細胞可以生長。
這種篩選的過程使在以后的實驗過程中只有被轉化的細胞作進一步的研
究。如果知道質粒DNA
出自http://www.bjsgyq.com/
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