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正文:

用倒立顯微鏡觀察原生質(zhì)體的制造

第一天---準(zhǔn)備

1.洗手。菠菜（spinach）、喇叭花（petunia）、煙草（tobacco）或大型綠藻（Green Macroalgae）的葉子，放在水龍頭下將葉子潤(rùn)濕，并拍乾。輕輕用鑷子或針刮葉子的下面。然后，切葉子約一公分平方的大小，并放入培養(yǎng)皿。取得足夠的葉片組織來(lái)覆蓋培養(yǎng)皿表面。（大型綠藻則用乾淨(jìng)海水沖洗）

2.取10ml 的緩沖溶液到15ml的試管或小燒杯，加入先前量好的酵素粉末

3.到溶液內(nèi)。攪拌或蓋住離心管前后搖晃直到酵素完全溶解。

4.小心地注入10ml的酵素液到培養(yǎng)皿的底部。

5.用鑷子將懸浮在酵素液的葉子壓下使其和溶液接觸，葉子可能會(huì)稍微重迭。

6.用parafilm或膠帶封培養(yǎng)皿并放置在室溫（約25℃）一天。若有足夠的設(shè)

備，輕微地?cái)嚢枧囵B(yǎng)皿將是有幫助的。

7.確定事先已準(zhǔn)備一盤(pán)的葉子在不含酵素的緩沖溶液內(nèi)。

第二天---觀察

8.輕微地?cái)嚢璨�搖晃在培養(yǎng)皿的溶液（如果在顯微鏡內(nèi)沒(méi)有觀察到原生質(zhì)

體，則在間隔15~30min再觀察一次）。

9.準(zhǔn)備一個(gè)未處理過(guò)葉子的玻片，并觀察其細(xì)胞的表面。

10.觀察原生質(zhì)體：

a.拿掉parafilm和蓋子，置培養(yǎng)皿于解剖顯微鏡約50 X【注：亦可直接用倒立顯微鏡觀察】下觀察或

b.用一個(gè)大孔徑的吸量管輕輕地吸取一些綠色的溶液并放置在顯微鏡玻片上。用蓋玻片覆蓋，以低倍光學(xué)顯微鏡下瀏覽之。
# 問(wèn)題分析

1.描繪浸在不含酵素的緩沖溶液中的葉片細(xì)胞，標(biāo)示所有觀察的部份并描繪細(xì)胞的外形。注意放大的倍率。

2.描繪含有酵素的溶液中的幾顆原生質(zhì)體，并形容它們的表面（注意放大的倍率）。

3.在什么情形下原生質(zhì)體和未處理的植物細(xì)胞不同？

4.原生質(zhì)體和動(dòng)物細(xì)胞的比較如何？

5.準(zhǔn)備一個(gè)玻片，放一片在含有酵素溶液的葉片，描繪并形容其邊緣。（注意放大的倍率）

6.基于你對(duì)原生質(zhì)體和葉片的觀察以及植物細(xì)胞構(gòu)成的知識(shí)，假設(shè)有關(guān)在酵素溶液內(nèi)酵素的作用。

6.為什么需要刮取并切葉片成小片？

7.為什么要溫和小心地對(duì)待原生質(zhì)體？

8.DNA可被加在經(jīng)特別處理過(guò)的細(xì)胞溶液中，在這樣的情況下細(xì)胞將會(huì)吸�。╱ptake）DNA。DNA轉(zhuǎn)殖的技術(shù)已常被用在細(xì)菌和酵母菌細(xì)胞之間。且不需制造原生質(zhì)體。為什么茄科在轉(zhuǎn)殖前必須先制備原生質(zhì)體。

出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科